【实验目的】1、熟悉构建分子系统发生树的基本过程,获得使用不同建树方法、建树材料和建树参数对建树结果影响的正确认识;2、掌握使用Clustalx进行序列多重比对的操作方法;3、掌握使用Phylip软件构建系统发生树的操作方法。【实验原理】在...
近年来的研究表明,一些短片断的双链RNA可以通过促使特定基因的mRNA降解来、特异的阻断体内特定基因表达,诱使细胞表现出特定基因缺失的表型,称为RNA干扰(RNAinterference,RNAi)。siRNA(smallinterferi...
(二)、操作流程1、原位PCR步骤1)预处理:(1)切片常规脱蜡;(2)0.2mol/LHCl处理10min;(3)5μg/ml蛋白酶k消化组织37℃10min;(4)Nase消化组织37℃30min;(5)梯度酒精脱水,室温干燥。2)原位...
扩增片段长度多态性Amplifiedfragmentlengthpolymorphism(AFLP)是在随机扩增多态性(RAPD)和限制性片段长度多态性(RFLP)技术上发展起来的DNA多态性检测技术,具有RFLP技术高重复性和RAPD技术...
荧光定量pcr(也称TaqManPCR,以下简称FQ-PCR)是美国PE(PerkinElmer)公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术,该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针来实现其定量功能的,与变通PCR相比,FQ-PCR具有...
GenecloningorrecombinantDNAtechnologyisthejoiningoftwoormoresegmentsofDNAtogenerateasingleDNAmoleculecapableofautonomous...
报告基因(reportergene)是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因,是一个其表达产物非常容易被鉴定的基因。把它的编码序列和基因表达调节序列相融合形成嵌合基因,或与其它目的基因相融合,在调控序列控制下进行表达,从而利用它的表达产物来标定...
PCR的假阳性问题是在PCR诞生之初就被深刻认识到了,同时由于造成假阳性的因素相对单一,因此假阳性并不是困惑检验工作的主要原因。如果一个项目只是阳性率高敏感性好的话,那么可以认为其阴性结果具备很高的可排除性,仍然有相当的临床适用价值。但PC...
越来越多的研究人员开始采用小分子干扰RNA(smallinterferingRNAs,siRNAs)来抑制特定的哺乳动物基因表达。siRNA是一种短片断双链RNA分子,能够以同源互补序列的mRNA为靶目标降解特定的mRNA,这个过程就是RN...
RAPD标记的一个明显的特点是RAPD引物无特异性,可以用未知序列的基因组DNA作为模板,通过PCR扩增获得一组不连续的DNA片段,且RAPD所需引物较短,10个左右的寡核苷酸即可。其次,一套引物可用于不同生物,建立一套标准引物,便可用于生...