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用MTS检测细胞生长

发布时间: 2016-10-31  点击次数: 560次

1.培养IL-2依赖细胞株CTLL-2细胞或HT-2细胞(检测IL-2),或者IL-3依赖细胞株FDC-P1细胞或FL5.12细胞(检测IL-3)到对数生长期。


2.取96孔细胞培养板,每孔加0.1ml含1×104~2×104上述细胞之一的Dmem培养液(加10%小牛血清)。


3.每孔加0.1ml系列稀释的待测细胞因子(IL-2或IL-3)样品或细胞因子标准品,在37℃ 5% CO2的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养24小时。


4.每孔加20μl MTS/PMS混合液,继续培养3~4小时显色。


5.检测前摇晃培养板10秒钟,混匀颜色。在酶联检测仪上,波长570nm(或490nm,或570nm和690nm)处检测各孔的光吸收值(OD)。用样品稀释度对OD值(OD570、OD490或OD570/OD690)绘制剂量-反应曲线,根据标准品曲线计算样品中细胞因子的量。

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