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减数分裂实验

发布时间: 2016-10-27  点击次数: 855次

一、实验目的 
通过植物花粉母细胞的制片和观察,了解小孢子的形成过程以及减数分裂中染色体的变化情况,并进一步掌握细胞染色体制片的基本技能。 
二、实验原理 
在高等生物里雌雄性细胞形成的过程中,都是先由有性组织(如花药和胚珠、精巢和卵巢)中的某些细胞分化为孢母细胞(2n,以及精母与卵母细胞(2 n)。进一步由这些细胞进行一种连续二次的减数分裂,即减数*分裂和减数第二分裂,zui终各自产生4个小孢子或精细胞,或是分别产生一个大孢子或卵细胞与三个退化的极体(1 n)。在分裂过程中,可以辩认染色体形态和数量上的动态变化,从而为遗传学研究中远缘种的分析、染色体工程中的异系鉴别、常规的组型分析以及三个基本规律的论证,提出了直接与间接的依据。 
三、实验材料 
蚕豆、水稻、玉米等花药。 
四、实验器具和药品试剂 
显微镜、镊子、解剖针、刀片、载玻片、盖玻片、量筒、滴瓶、切片架、切片盒、15cm培养皿、小培养皿、广口瓶、吸水纸。 
甲醇、冰醋酸、95%乙醇、无水乙醇、树胶、改良苯酚品红染色液。 
五、实验方法和步骤 
(一)取材固定 取材的时间及材料大小必须十分恰当,才能获得更多的花粉母细胞分裂相,以供观察。 
1.蚕豆 蚕豆现蕾后,于上午79时摘取茎顶幼小花序,将周围小叶和苞叶去掉,留长约1mm 左右的花苞,放入内装有卡诺氏固定液的广口瓶中,固定324小时,转入70%酒精中置冰箱内保存。 
2.水稻 剑叶与其下一叶的叶枕平齐,即叶枕距为零时取材,早熟品种应适当提前,叶枕距可为负;晚熟品种应延迟,叶枕距应为正。通常穗长68cm,颖花长3mm为花粉母细胞分裂始期;穗长1315cm,颖花长4mm为减数分裂盛期;穗长达全长,颖花长6mm时为减数分裂终期。于上午69时依上述标准取材,固定保存方法同上。 
3.玉米 玉米孕穗初期,早熟品种约10片*展开叶,中熟品种约1214片展开叶,晚熟品种约1416片展开叶时取材。从喇叭口往下捏叶鞘,有松软感觉,即为雄花序所在部位,用刀片纵向划一切口,剖开取出数条花序分枝检查,如果先端小颖花长34mm,花药长23mm时,花粉母细胞减数分裂相较多,即可取用。取材时间一般为上午79时,固定保存方法同上。 
(二)制片方法 先将玉米幼穗置于培养皿内,加进少许70%酒精,以防材料变干。实验时,取某一分枝,从不同部位剥离出颖花放在载玻片上。用解剖针或镊子剥开颖壳,取出花药,把颖壳清理干净后,用刀片把花药横切二至三段,滴一滴染液,用镊子将花粉母细胞从花药中挤压出来。先用低倍镜检查,如有所需时期的细胞,即可将花药移到另一块载玻片上,滴上染液,再次将花粉母细胞挤出来,可重复做二至三张片。待把空的花药壁清除干净后,再盖上盖玻片,换至高倍镜观察。 
(三)制作*切片