pcr反应条件三要素为温度、时间和循环次数。温度与时间的设置基于PCR原理三步骤而设置变性-退火-延伸三个温度点。在标准反应中采用三温度点法，双链DNA在90～95℃变性，再迅速冷却至40～60℃，引物退火并结合到靶序列上，然后快速升温至7...

随着PCR技术的发展，人们在此基础上建立起了一系列基于基因分离的新技术新方法。如mRNA差别显示技术（DDRT-PCR）、以及进一步改进的代表性差示分析（RAD），抑制性扣除杂交（SSH）和交互扣除RNA差别显示技术（RSDD）。差别显示Ｐ...

1.概述在自然条件下,很多质粒都可通过细菌接合作用转移到新的宿主内,但在人工构建的质粒载体中,一般缺乏此种转移所必需的mob基因,因此不能自行完成从一个细胞到另一个细胞的接合转移。如需将质粒载体转移进受体细菌，需诱导受体细菌产生一种短暂的感...

长片断的双链RNA(dsRNA)导入例如植物，真菌，果蝇，线虫等生物的细胞中会引发同源mRNA的降解——这就是所谓的RNAinterference(RNAi)。RNAi分两个步骤，首先是长片断双链dsRNAs被核酶Dicer切割成21—25...

【1】．DEAE－葡聚糖法一、实验材料：1．50mg/mlDEAE-葡聚糖溶液（500mgDEAE-葡聚糖溶于10ml水，1ml分装，高压灭菌，储存于-20℃）（Sigma）2．TBS溶液(PH7.4)NaCL8.0g/LKCL0.2g/L...

NAi现象的发现，是在外源的多拷贝转基因被引入牵牛花后所激起的一个特定序列的基因沉默响应。RNAi导致了封面上的花的双色彩图案。Ａｒｇｏｎａｕｔｅ是RNAi效应复合体中的标志组分，本期封面上登载了它的晶体结构，其中ＰＡＺ域用蓝色显示，ＰＩＷ...

1前言RNA是生物体内zui重要的物质基础之一，它与DNA和蛋白质一起构成生命的框架。但长久以来，RNA分子一直被认为是小角色。它从DNA那儿获得自己的顺序，然后将遗传信息转化成蛋白质。然而，一系列发现表明——这些小分子RNA事实上操纵着许...

基因沉默（genesilencing）是生物体内特定基因由于种种原因不表达的遗传现象。一方面，基因沉默是生物遗传操作创造新的遗传修饰生物（geneticallymodifiedorganisms）的障碍，另一方面，它又是植物抵抗外来核酸入侵...

一基因组酶切和电泳在200μl微量离心管中加入：25μlDNA样品(约10μg)，3μl限制性内切酶（MBI，10U/μl）5μl相应的10×buffer，补水到50μl。然后加一滴矿物油覆盖,稍微离心后放于37℃水浴8-12小时。酶切完后...

国外越来越多的研究单位和公司都采用rnai技术平台来筛选药物的靶点或疾病的靶点。目前在模式生物中取得了很大进展，如果蝇，斑马鱼，线虫等，今后的工作重点则是在高等的哺乳动物，尤其是小鼠等，这种高通量的筛选方法是今后发展的重要趋势和手段。Chr...