羟化酶亦称为氢氧化酶，是加氧酶的一种，是催化利用氧分子形成氢氧化物（酚、醇）反应的酶。所谓单（加）氧酶，除底物外，还需要电子供体（NADP-H），AH+O2+NADPH+H+→AOH+NADP++H2O，在从苯丙氨酸合成酪氨酸，（苯丙氨酸羟...

一、原理1.葡聚糖凝胶SephadexG-200凝胶柱层析利用大分子不能进入凝胶颗粒内部zui先流出柱外，而小分子物质进入凝胶颗粒内部，流速慢而zui后流出柱外，凝胶层析法能将不同分子大小的物质分离开。（G-200能分离800-80000D...

定量蛋白质组学是蛋白质研究的前沿学科。目前常用的定量蛋白质组学研究技术有荧光差异凝胶电泳（DIGE）、同位素亲和标记（ICAT）等。同位素标记相对和定量（iTRAQ）技术是近年来开发的一种新的蛋白质组学定量研究技术。结合非凝胶串联质谱技术，...

他们提出使用一种试剂，这种试剂能够使两种同位素在形式上具有明显的区别，即同位素标记的亲和标签(isotopicallycodedaffinitytag，ICAT)试剂。ICAT试剂的结构包含一个生物素头部、一个连接部分和一个碘激活的羰基基团...

【材料与试剂】（1）2×SDS凝胶加样缓冲液（2）聚丙烯酰胺凝胶电泳槽和电泳仪（3）加样器和吸头等（4）水浴锅【操作方法】（1）把上述处理的样品按1:1（V/V）与2×SDS凝胶加样缓冲液混合，100℃加热3分钟，使蛋白质变性；（2）取出变...

勃起功能障碍是男性zui常见的糖尿病引起的并发症之一，目前评估表明，多达75％的男性糖尿病患者会有一定程度的勃起功能障碍，而且在许多病例中糖尿病患者会有更严重的勃起功能障碍，对常用勃起药物反应较差。细胞分析蛋白组学三月份有篇研究报道，来自凯...

由电泳迁移率的公式可以看出，影响电泳分离的因素很多，下面简单讨论一些主要的影响因素：1.待分离生物大分子的性质待分离生物大分子所带的电荷、分子大小和性质都会对电泳有明显影响。一般来说，分子带的电荷量越大、直径越小、形状越接近球形，则其电泳迁...

1．目的了解外源基因在原核细胞中表达的特点和方法。2．原理外源基因克隆在含有lac启动子的表达系统中。先让宿主菌生长，lacI产生的阻遏蛋白与lac操纵基因结合抑制下游的外源基因转录。向培养基中加入诱导物IPTG（异丙基硫代-b-D-半乳糖...

由于银染的灵敏度很高，可染出胶上低于1ng/蛋白质点，故广泛的用在2D凝胶分析上。待找到自己感兴趣的蛋白质点后，再通过考染富集该目的点，然后做进一步的肽段指纹图谱分析（PMF）或序列测定。随着质谱技术的不断完善和发展，对银染后的fmol级的...

在分析质谱产生的二维图谱上的蛋白质斑点时，看起来似乎只有通常含量比较高的蛋白质(编码偏倚指数大于0.2)才能*被鉴定出来。因而，二维胶上的斑点数量不能代表可以分析的全部表达的基因的数量或种类。Gygi等(2000)曾经计算过，在二维作图的早...