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DNA产物纯化常见问题分析

发布时间: 2015-10-21  点击次数: 929次

1. 漂洗缓冲液中没加入乙醇.在使用前应确保乙醇已加入漂洗液PW中。 

2. 吸附材料上有乙醇残留.洗脱时硅胶膜或硅胶树脂上有漂洗缓冲液残留,因含乙醇会降低洗脱效率。在洗脱前可通过再次离心或置于50℃烤箱中5-10分钟,*去除漂洗缓冲液。 

3. 洗脱缓冲液pH值偏低.DNA只在低盐buffer中才能被洗脱,如洗脱缓冲液EB (10 mM Tris·Cl, pH 8.5)或水。洗脱效率取决于pH值。zui大洗脱效率在pH7.0-8.5间。当用水洗脱时确保其pH值在此范围内。 

4. 洗脱液加入位置不正确.洗脱液应加在硅胶膜中心部位以确保洗脱液会*覆盖硅胶膜的表面,达到zui大洗脱效率。 


DNA质量不好 

洗脱产物含有乙醇残留.洗脱时硅胶膜或硅胶树脂上有漂洗缓冲液残留,会使洗脱产物中含有乙醇,影响下游操作。在洗脱前可通过再次离心或置于50℃烤箱中5-10分钟,*去除漂洗缓冲液。