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如何进行细胞的分裂指数测定

发布时间: 2015-01-19  点击次数: 501次

一、原理 
体外培养细胞生长、分裂繁殖的能力,可用分裂指数来表示。它与生长曲线有一定的,如随着分裂指数的不断提高,细胞也就进入了指数生长期。分裂指数指细胞群体中分裂细胞所占的百分比,它是测定细胞周期的一个重要指标,也是不同实验研究选择细胞的重要依据。


二、仪器、用品与试剂

1.  仪器与用品:CO2培养箱、普通显微镜、细胞培养血、盖玻片、吸管

2.  试剂:培养液、胰酶、甲醇、冰醋酸、Giemsa染液


三、 操作步骤

1.  消化细胞,将细胞悬液接至内含盖玻片的培养皿中。

2.  CO2培养箱中培养48小时,使细胞长在盖片上。

3.  取出盖片,按下列顺序操作:

PBS漂洗3分钟→甲醇:冰醋酸=3:1固定液中固定30分钟→Giemsa液染色10分钟→自来水冲洗。

4.  盖片晾干后反扣在载玻片上,镜检。

5.  计算:

分裂指数=分裂细胞数/总细胞数×100%


四、注意事项 
操作时动作要轻,以免使盖片上的细胞脱落。