士锋生物骨骼肌兴奋与收缩实验注意事项

取蛙进行毁髓后制作坐骨神经-腓肠肌标本，将标本与计算机采集系统相连，采集蛙肌肉收缩的张力信号。对标本进行单刺激，可以采集到一个由潜伏期、收缩期和舒张期组成的收缩信号。对标本进行串刺激，可以观察到收缩的总和信号曲线。进一步缩短刺激间隔时，可以观察到强直收缩。
【方法与步骤】
1．蛙的单毁髓与双毁髓
一手握住蛙，背部向上（参见图1）。用拇指压住蛙的背部，示指按压其头部前端，使头端向下低垂；另一手持毁髓针，由两眼之间沿中线向后触划，当触及到两耳中间的凹陷处（此处与两眼的连线成等边三角形）时，持针手即感觉针尖下陷，此处即是枕骨大孔的位置。将毁髓针由凹陷处垂直刺人，即可进入枕骨大孔。然后将针尖向前刺人颅腔，在颅腔内搅动，以捣毁脑组织。如毁髓针确在颅腔内，实验者可感到针尖触及颅骨。此时的动物为单毁髓动物。再将毁髓针退至枕骨大孔，针尖转向后方，与脊柱平行刺入椎管，以捣毁脊髓。*捣毁脊髓时，可看到动物的后肢突然蹬直，而后瘫软如棉，此时的动物为双毁髓动物。如动物仍表现四肢肌肉紧张或活动自如，必须重新毁髓。操作过程中应注意使蟾蜍头部向外侧（不要挤压耳后腺），防止耳后腺分泌物射人实验者眼内（如被射入，则需立即用生理盐水冲洗眼睛）。
2．坐骨神经—腓肠肌标本制备
（1）剥制后肢标本
将蛙腹面向上放人蜡盘中。一手持手术镊轻轻提起耻骨联合上方的皮肤，另一手用手术剪横向剪开皮肤，再剪开体壁肌肉（开口要大）。然后用手术镊轻轻提起内脏，自耻骨部剪断（勿损伤脊神经）。一手轻轻托起蛙后肢，使头部及内脏向下，看清支配后肢的脊神经发出部位，于其前方用金冠剪横向剪断脊柱。然后再沿脊柱两侧到横向切口剪断体壁，一手用蘸有任氏液的拇指和示指捏住断开的脊柱后端，另一手向后撕剥皮肤并除去断开脊柱以上部位肢体及内脏。如果下肢撕皮困难，可在撕皮至股部时，用手勾住双股中间后再行撕剥（右图）。将剥干净的后肢放人任氏液中备用。清洗手及用过的手术器械。
（2）分离两后肢
将去皮的后肢腹面向上置于玻璃板上，脊柱端在左侧，用左手拇指和示指固定标本的股部两侧肌肉，右手持手术刀，于耻骨联合处向下按压刀刃，切开耻骨联合。然后用手托起标本，用金冠剪剪开两后肢相连的肌肉组织，并纵向剪开：脊柱（尾杆骨留在一侧），使两后肢*分离。将分开的后肢，一只继续剥制标本，另一只放人任氏液中备用。