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快速、灵敏安全的考马斯蛋白染色

发布时间: 2015/3/27  点击次数: 974次      文件下载    图片下载    

快速方便的染色步骤

SimplyBlue? SafeStain的实验步骤易于操作,在不到3个小时的时间内就能完成,条带在染色液中马上可以显现,不需要脱色,但是为了达到*灵敏度,可以使用基于水的脱色步骤。

灵敏的染色结果

SimplyBlue? SafeStain融合了*的胶体状考马斯G-250染色液和一种优化的染色步骤,达到纳克级的灵敏度,1微克蛋白在染液中5分钟就可以检测到,使用额外的基于水的脱色可以检测到7ng蛋白(还原型BSA)(图1 )。

图1 使用SimplyBlue? SafeStain灵敏的染色结果

下列样品在Nupage? Novex 4-12% Bis-Tris gel上分离,然后使用SimplyBlue? SafeStain染色。

Lane1 : 6 μg protein mix

Lane 2: 1 μg rabbit IgG

Lane 3: 1 μg reduced BSA

Lane 4: 5 μg E.coli lysate

Lane 5: 20 ng reduced BSA

Lane 6: 10 ng reduced BSA

Lane 7: 7 ng reduced BSA

Lane 8: 3 ng reduced BSA

Lane 9: 10 μg Mark12? Satndard

Lane 10: 5 μg Mark12? Standard

安全无害的染色液

不象传统的R-250和部分G-250染液,SimplyBlue? SafeStain不需要甲醇或醋酸固定/脱色,避免了暴露在有毒物质和异味中的危险,创造了一个更安全的实验室环境。因为使用SimplyBlue? SafeStain不需要有害物质的相关花费,你节省了有毒物品的运输、储存和处理费用,独立测试确认SimplyBlue? SafeStain无毒、无害、不易燃烧且无腐蚀性。在大多数地区,SimplyBlue? SafeStain可以直接倒入下水道。

质谱兼容的染液

使用SimplyBlue? SafeStain染色的蛋白和质谱分析兼容,所以你将得到目的蛋白*覆盖度(图2 ,3 和表1 )。

图2 菠菜染色质提取物的双向电泳(2DE)实验;用SimplyBlue? SafeStain染色

用ZOOM? IEF Fractionator对菠菜染色质提取物进行预分离,不同的组分进行2D分离,使用一定pH区间的ZOOM?胶条和NuPAGE 4-12%Bis-Tris ZOOM?胶。然后用SimplyBlue? Safestain进行染色。

图3 用SimplyBlue? SafeStain染色的菠菜染色质MALD1图谱

ATP合成酶CF1 β-链的MALDI指纹

表1 用SimplyBlue? SafeStain染色后的光谱分析结果

蛋白质%覆盖度Z-值
1光合体系II的放氧复合体蛋白1(菠菜)702.43
2ATP合成酶CF1 β-链(菠菜)802.43
3二磷酸核酮糖羧化酶激酶(菠菜)632.43