快速方便的染色步骤
SimplyBlue? SafeStain的实验步骤易于操作,在不到3个小时的时间内就能完成,条带在染色液中马上可以显现,不需要脱色,但是为了达到*灵敏度,可以使用基于水的脱色步骤。
灵敏的染色结果
SimplyBlue? SafeStain融合了*的胶体状考马斯G-250染色液和一种优化的染色步骤,达到纳克级的灵敏度,1微克蛋白在染液中5分钟就可以检测到,使用额外的基于水的脱色可以检测到7ng蛋白(还原型BSA)(图1 )。
图1 使用SimplyBlue? SafeStain灵敏的染色结果
下列样品在Nupage? Novex 4-12% Bis-Tris gel上分离,然后使用SimplyBlue? SafeStain染色。
Lane1 : 6 μg protein mix
Lane 2: 1 μg rabbit IgG
Lane 3: 1 μg reduced BSA
Lane 4: 5 μg E.coli lysate
Lane 5: 20 ng reduced BSA
Lane 6: 10 ng reduced BSA
Lane 7: 7 ng reduced BSA
Lane 8: 3 ng reduced BSA
Lane 9: 10 μg Mark12? Satndard
Lane 10: 5 μg Mark12? Standard
安全无害的染色液
不象传统的R-250和部分G-250染液,SimplyBlue? SafeStain不需要甲醇或醋酸固定/脱色,避免了暴露在有毒物质和异味中的危险,创造了一个更安全的实验室环境。因为使用SimplyBlue? SafeStain不需要有害物质的相关花费,你节省了有毒物品的运输、储存和处理费用,独立测试确认SimplyBlue? SafeStain无毒、无害、不易燃烧且无腐蚀性。在大多数地区,SimplyBlue? SafeStain可以直接倒入下水道。
质谱兼容的染液
使用SimplyBlue? SafeStain染色的蛋白和质谱分析兼容,所以你将得到目的蛋白*覆盖度(图2 ,3 和表1 )。
图2 菠菜染色质提取物的双向电泳(2DE)实验;用SimplyBlue? SafeStain染色
用ZOOM? IEF Fractionator对菠菜染色质提取物进行预分离,不同的组分进行2D分离,使用一定pH区间的ZOOM?胶条和NuPAGE 4-12%Bis-Tris ZOOM?胶。然后用SimplyBlue? Safestain进行染色。
图3 用SimplyBlue? SafeStain染色的菠菜染色质MALD1图谱
ATP合成酶CF1 β-链的MALDI指纹
表1 用SimplyBlue? SafeStain染色后的光谱分析结果
点 | 蛋白质 | %覆盖度 | Z-值 |
1 | 光合体系II的放氧复合体蛋白1(菠菜) | 70 | 2.43 |
2 | ATP合成酶CF1 β-链(菠菜) | 80 | 2.43 |
3 | 二磷酸核酮糖羧化酶激酶(菠菜) | 63 | 2.43 |