测序常见问题及其分析

1、PCR 产物测序时出现重叠峰

问题图1（模板中有碱基缺失，往往是单一位点（1-1）或两个位点（1-2）碱基缺失导致测序
结果移码）
图1-1

解决方法：将PCR 产物克隆到质粒（如T 载体）中挑单克隆测序，或将PCR 产物进行page
纯化（至少琼脂糖充分电泳后切胶纯化）后再进行测序。
问题图2（PCR 产物不纯，含部分序列一致的两种以上的片段，长度不一）
图2