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台盼蓝染色法

发布时间: 2014-12-22  点击次数: 1309次

  材料:
      1. 显微镜、玻片、盖玻片、滴管;
      2. 试剂:0.4%台盼蓝染液;
      3. 台盼蓝(Trypan blue):0.4g;                                           
      4. 生理盐水:100ml;
 
      操作步骤:
      1. 用Hanks液配制0.1%台盼蓝溶液;
      2. 用0.5%胰蛋白酶:0.2%EDTA=1:1混合液来消化培养的贴壁细胞;
      3. 再加入适量Hanks液制成细胞悬液;
      4. 将待染色细胞稀释至所需浓度(方法及浓度范围与细胞计数相同);
      5. 每0.1ml细胞悬液约加新鲜配制的染液一小滴,室温下染3—5min;
      6. 染色过的细胞材料,取一滴细胞悬液置玻片上,加盖玻片后放高倍镜下观察;
      7. 死亡的细胞着浅蓝色并膨大,无光泽。活细胞不着色并保持正常形态,有光泽;
      8. 计数1000个细胞中的活细胞和死细胞数目;
      9. 统计未染色细胞。可按公式计算出细胞活率。
       细胞活率(%)=未染色的细胞数/观察的细胞总数×100。