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免疫组织化学:几种溶液的配制方法

发布时间: 2013-12-16  点击次数: 862次

1、PBS:
取ZLI-9061 PBS溶于1000ml的蒸馏水中,混匀,测pH值应在7.2~7.4之间,若偏离此范围,请用0.1N的HCL或NaOH调整。
2、TBS:
2.1 Tris缓冲液配方:(0.5 M pH7.6)
Tris(三羟甲基氨基甲烷)
60.57g
1N HCL
约420ml
双蒸水
加至1000ml
Tris缓冲液配制方法:
先以少量双蒸水(300~500ml)溶解Tris,加入HCl后,用HCl(1N)或NaOH(1N)将pH调至7.6, zui后双蒸水加至1000ml。此液为储备液,4℃冰箱中保存。
2.2 TBS配方:
Tris-HCI缓冲液(0.5M pH7.6)
100ml
NaCI
8.5~9g (0.15mol/L)
双蒸水
加至1000ml
TBS配制方法:
先以少量双蒸水溶解NaCl,再加入Tris-HCl缓冲液,zui后加双蒸水至1000ml,充分摇匀。
3、枸橼酸盐缓冲液(Citrate buffer):
3.1 储存液:
A. 0.1M枸橼酸溶液:称取21.01g枸橼酸(C6H8O7·H20)溶于1000ml蒸馏水中。
B. 0.1M枸橼酸钠溶液:称取29.41g枸橼酸钠(C6H5Na3O7·2H20)溶于1000ml蒸馏水中。
3.2 工作液:
取9ml A液和41ml B液加入450ml蒸馏水中,溶液pH值应为6.0±0.1
4、胰酶(Trypsin):
4.1 ZLI-9011胰蛋白酶消化液:
常用浓度为0.125%,即使用前将一滴试剂1胰酶溶液和三滴试剂2胰酶稀释液均匀混合(1:3稀释),则可直接滴加使用。胰酶的zui终浓度可以根据使用者的要求进行调整,浓度范围可以从0.05%(1:10稀释)至0.25%(1:1稀释)。